ساخت کتابخانه آنتی بادی شتری دایمر با قابلیت ویژگی و ظرفیت دوگانه برعلیه مارکرهای توموری
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهرکرد - دانشکده علوم پایه
- نویسنده ارغوان سلیمانی زاده
- استاد راهنما علی محمد احدی هدا آیت
- سال انتشار 1391
چکیده
در این پژوهش دو کتابخانه آنتی بادی دو ظرفیتی و دو ویژگی vhh-vhh و vhh-vh بر ضد آنتی ژن های توموری رده سلولی skbr3 ساخته شد. این لاین سلولی مارکرهای توموری مربوط به سرطان سینه را بیان می کند، که از جمله آن ها her2 است که بیان بالایی در این لاین سلولی دارد. مارکرهای توموری مولکول هایی هستند که قادرند حضور سرطان را محرز کنند و اطلاعاتی در مورد رفتار بعدی سرطان مثل قابلیت متاستاز و یا پاسخ به درمان فراهم آورند. بعد از کشف آنتی بادی شتری به عنوان آنتی بادیی که عاری از زنجیره سبک است، توجه دانشمندان به سمت این آنتی بادی به عنوان یک وسیله مفید برای تشخیص و درمان بسیاری از بیماری ها جلب شد. مهمترین مزیت دمین متغیر این آنتی-بادی (vhh)، کوچکی و به دنبال آن ایمنی زایی پایین در انسان و قابلیت ردیابی آنتی ژن هایی است که خارج از دسترس دیگر آنتی بادی هاست. مطالعات مختلف نشان داده اند که اشکال دو ظرفیتی و دو ویژگی آنتی بادی تمایل و اختصاصیت بسیار بالاتری برای اتصال به آنتی ژن نسبت به آنتی بادی های تک ظرفیتی دارند. نواحی متغیر زنجیره های سنگین vh و vhh به کمک واکنش pcr، از cdna سنتز شدند. لولای آنتی بادیigg2 و igg3 شتر، به عنوان لینکر برای اتصال vhh به vhh و همچنین اتصال vh به vhh، مورد استفاده قرار گرفتند. دو قطعه آنتی بادی به کمک روش انتقال به وکتور به هم متصل شدند. در ابتدا قطعه vhh-hing به کمک آنزیم برش دهنده sac1 و xho1 به درون وکتور فاژمیدی pcomb3x، انتقال داده شد. در مرحله بعد، قطعات vhh و vh که با کمک آنزیم-های spe1 و xho1 برش داده شدند، به وکتور منتقل شدند. سرانجام وکتور حاوی آنتی بادی دو ظرفیتی و دو ویژگی vhh-hing-vhh و vhh-hing-vh با کمک الکتروپوریشن به درون باکتری الکتروکامپتنت dh5? انتقال داده شد و کتابخانه هایی با بزرگی 105 کلون ساخته شد. همچنین بیان این کتابخانه بررسی شد. به منظور بررسی تنوع کتابخانه های حاضر، بر روی چند نمونه rflp انجام شد. تفاوت در الگوی برش قطعات، نشان دهنده تنوع کتابخانه حاضر است.
منابع مشابه
ساخت کتابخانه ی آنتی بادی تک دمین شتری بر ضد آنتی ژن های سلولی سرطان سینه
زمینه و هدف: آنتی بادی های زنجیره سنگین شتری Camelied-derived heavy chain) (VHH= یک آنتی بادی شتری بوده و کوچک ترین واحد باند شونده به آنتی ژن است. اندازه کوچک نانوبادی ها بزرگ ترین مزیت آن ها می باشد که سبب دستکاری ژنتیکی راحت آن ها می شود. این مطالعه با هدف ساخت کتابخانه ی آنتی بادی تک دمین از شتر ایمن شده با یک رده سلولی آدنوکارسینومای سینه ی انسان (SKBR3) طراحی و اجرا شد. روش بررسی: در این ...
متن کاملساخت کتابخانه ی آنتی بادی تک دمین شتری بر ضد آنتی ژن های سلولی سرطان سینه
زمینه و هدف: آنتی بادی های زنجیره سنگین شتری camelied-derived heavy chain) (vhh= یک آنتی بادی شتری بوده و کوچک ترین واحد باند شونده به آنتی ژن است. اندازه کوچک نانوبادی ها بزرگ ترین مزیت آن ها می باشد که سبب دستکاری ژنتیکی راحت آن ها می شود. این مطالعه با هدف ساخت کتابخانه ی آنتی بادی تک دمین از شتر ایمن شده با یک رده سلولی آدنوکارسینومای سینه ی انسان (skbr3) طراحی و اجرا شد. روش بررسی: در این ...
متن کاملساخت کتابخانه آنتی بادی تک دمینی از vhh شتر بر ضد آنتی ژن های توموری سرطان سینه
vhh(نانوبادی) آنتی بادی یافت شده در سرم شترسانان وکوچک ترین واحد باند شونده به آنتی ژن است. سایزکوچک نانوبادی ها بزرگ ترین مزیت آن ه امی باشدکه به همین سبب دستکاری ژنتیکی آن هاراحت تراست. هدف از انجا م این تحقیق ساخت کتابخانه ی آنتی بادی تک دمین از شتر ایمن شده با یک لاین سلولی آدنوکارسینومای سینه ی انسان (sk-br-3) است. در ابتدا قطعه ی vhh تکثیر شد. vhhدرون پلاسمید pcomb3x کلون شد و پلاسمید نوت...
غنی سازی کتابخانه نمایش فاژی علیه سلول های سرطانی سینه به منظور تولید آنتی بادی های تک دومینی شتری شناساگر فاکتور رشد اپیدرمالی 2
چکید ه سابقه و هدف ریزش مارکرهای سرطانی مانند HER2 از سطح سلول‌های سرطانی سینه، باعث مخفی ماندن آن‌ها از دید سلول‌های ایمنی می‌گردد. افزایش غلظت HER2 محلول( sHER2 )، در نتیجه درمان سرطان سینه HER2+ و پاسخ به تراستوزومب، تاثیرگذار است. در همین راستا، آنتی‌بادی‌های تک دومینی شتری( VHH ) به علت خصوصیات منحصر به فرد و توانایی بالا در شناسایی آنتی‌ژن، مواد هدفمند بسیار مؤثری در شناسایی sHER2 م...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهرکرد - دانشکده علوم پایه
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023